Farmagülatör farmavet tarafından geliştirilmiş bir üründür.Ve yıllara dayanan ar&ge çalışmaları tavukçuluk sektöründe çok başarılı sonuçlar veren Farmagülatörün bu sonuçları nasıl sağladığını bir,bir ortaya koymaktadır. İşte bir yeni veri daha. Yorumlarınıza açıktır, bilgilerinize sunulur.
Yumurta tavuklarında rasyona ilave edilen humat ve organik asitlerin bazı hematolojik parametreler üzerine etkisi
Nazmi ÇETİN1, Ebru ÇETİN1, Berrin KOCAOĞLU GÜÇLÜ2
1Erciyes Üniversitesi Veteriner Fakültesi Fizyoloji Anabilim Dalı; 2Hayvan Besleme ve Beslenme Hastalıkları Anabilim Dalı, Kayseri.
Özet: Bu çalışma, yumurta tavuklarında rasyona ilave edilen humat ve organik asitlerin bazı kan parametreleri üzerine etkisini incelemek amacıyla yapıldı. Çalışmada toplam 30 beyaz yumurta tavuğu kullanıldı. Hayvanlar eşit olarak 3 gruba ayrıldı. Kontrol grubu humat veya organik asit ilave edilmeyen bazal (kontrol) rasyonla beslenirken deneme gruplarından birine % 0.15 humat, diğer deneme grubuna ise % 0.20 oranında organik asit ilave edilen rasyon 60 gün süreyle verildi. Deneme periyodunun sonunda kan örnekleri alınarak hematolojik parametreler değerlendirildi. Gruplar arasında yapılan karşılaştırmada, humat ve organik asit grubunun heterofil oranında kontrol grubuna göre önemli bir artma tespit edildi. Diğer taraftan humat ilavesinin eritrosit sayısı ile hemoglobin miktarında önemli bir artma (p<0.05) oluşturduğu gözlendi. Humat ve organik asit ilavesinin total lökosit sayısı ile T-lenfosit, lenfo-sit, monosit, eozinofil ve bazofil oranları ve hematokrit değerde herhangi bir değişiklik oluşturmadığı saptandı.
Anahtar sözcükler: Hematolojik parametre, humat, organik asit, yumurta tavuğu.
Effect of humate and organic acids supplementation to ration on some haematological parameters in laying hens
Summary: This study was carried out to determine the influence of supplemental humate and organic acids on some haematologic parameters in laying hens. A study was conducted with total 30 white hens. Hens were assigned into three groups equally. The control group was fed a basal diet without humate and organic acid, and treatment groups were fed either 0.15 humate or 0.20 % organic acids added diets. At the end of 60- day treatment period, samples of blood were collected to determine haematologic values. The comparison among the groups showed that both the humate and organic acids supplementation resulted in significant increases (p<0.05) in the heterophil ratio compared with those of the control group. On the other hand, it was observed that the humate supplementation caused statistically significant increases (p<0.05) in the erythrocyte count and haemoglobin concentration. Total leukocyte count, T lymphocyte, lymphocyte, monocyte, eosinophil and basophil ratios, and haematocrit value were not affected by dietary humate and organic acid.
Key words: Hematological parameter, humate, laying hen, organic acid.
Giriş
Hayvanlarda büyümeyi hızlandırmak ve verimi ar-tırmak amacıyla yem katkı maddesi olarak probiyotik, prebiyotik ve antibiyotik gibi çeşitli kimyasal maddeler sıklıkla kullanılmaktadır (19, 29). Birçok ülkede patojenik mikroorganizmaların direncini artırdığı gerek-çesiyle, antibiyotik kullanımının kısıtlanması veya yasak-lanması sonucu alternatif olarak başka yem katkı madde-lerinin kullanımı hızla yaygınlaşmaktadır. Humik asit, fulvik asit, ulmik asit, propiyonik asit gibi çeşitli madde-ler de yem katkı maddesi olarak son yıllarda kanatlı yem-lerinde kullanılmaya başlanmıştır (2, 6, 9, 18).
Humatlar toprakta bakteriler aracılığı ile çürüyen bitkilerden meydana gelir ve başlıca humik asit, fumik asit ve ulmik asit ile tuzlarından ve minerallerden oluşur (11). Humat bileşiklerinin, sindirim kanalında optimum pH oluşumunu sağlayarak patojen mikroorganizmaların çoğalmalarını engellemek, kalsiyum ve çeşitli iz mineral-lerden yararlanmayı artırmak suretiyle hayvanlarda olumlu etki gösterdikleri bildirilmektedir (12, 24). Ben-zer şekilde, fumarik asit, sorbik asit, asetik asit ve laktik asit gibi organik asitleri ve tuzları da; sindirim kanalın-daki mikroorganizma popülasyonunu kontrol altında tutmaları, pH#8217;yı düşürerek enzimatik protein sindirimine katkıda bulunmaları, yumurta kalitesini ve yemden yarar-lanmayı artırmaları nedeniyle kanatlı yemlerine katıl-maktadır (24, 27). Humik ve fulvik asitler, kurşun, civa, kadmiyum gibi ağır metallerle ve patojenik bakteri tok-sinleri ile şelat oluşturarak bunların detoksifikasyonunda önemli rol oynarlar (14). Humatların aynı zamanda viral partiküllerin hücre yüzeyine yapışmalarını engelleyerek antiviral etki gösterdikleri bildirilmiştir (16, 23).
Sıçanlara verilen humik asidin plazma total koleste-rol, total lipit ve glikoz düzeyini azalttığı, buna karşılık globulin, hemoglobin, hematokrit ve eritrosit sayısını ise artırdığı bildirilmiştir (3). Bailey ve ark. (2), humatın hindilerde karın bölgesi yağ tabakasını incelttiğini tespit etmişlerdir. Kanatlı yemine katılan humatların kalsiyum, alüminyum ve demirin plazma seviyelerini artırdığı (28), immun sistemi aktivite ettiği bildirilmiştir (20). İrradiye edilen ratlarda, humik asidin azalan lökosit, eritrosit, platelet sayısı ile hemoglobin ve hematokrit değerlerini artırdığı vurgulanmıştır (11).
Parametreler Gruplar
Kontrol
(n=10) Humat
(n=10) Organik asit
(n=10) F
Eritrosit (x106/mm3 ) 2.36 ± 0.9a 3.57 ± 0.1b 2.25 ± 0.1a 3.543
Hemoglobin (g/ dl) 7.31 ± 0.3a 12.21 ± 0.2b 8.34 ± 0.5a 4.324
Hematokrit (%) 26.00 ± 0.6 28.02 ± 0.4 25.37 ± 0.3 0.873
Lökosit (x103/mm3) 32.60 ± 2.5 35.30 ± 3.7 34.60 ± 1.9 1.426
Heterofil (%) 24.80 ± 2.06a 29.10 ± 2.36b 31.50 ± 2.02b 3.540
Lenfosit (%) 62.50 ± 2.23 59.43± 2.52 57.47 ± 2.08 0.763
Monosit (%) 5.60 ± 2.17 5.50 ± 0.89 6.30 ± 0.61 0.653
Eozinofil (%) 3.60 ± 0.41 3.30 ± 0.36 2.10 ± 0.37 0.872
Bazofil (%) 3.50 ± 0.16 2.67 ± 0.25 2.63 ± 0.20 0.698
ANAE (+)* Lenfosit (%) 49.24 ± 1.11 52.61 ± 1.19 51.24 ± 1.15 0.983
Trombosit (x103/mm3 ) 56.46 ± 3.23 59.23 ± 2.53 60.15 ± 1.72 1.564
Tablo 2. Humat ve organik asitlerin bazı kan hematolojik parametreler üzerine etkisi.
Table 2. Effect of humate and organic acids on some hematological parameters.
Değerler; ortalama ± SH olarak verilmiştir.
a,b: Satırlarda farklı küçük harf taşıyan değerler istatistiksel olarak farklıdır (p<0.05).
*: Alfa naftil asetat esteraz pozitif.
Yem katkı maddesi olarak kullanılan humatlar ile propiyonik asit ve formik asit gibi bazı organik asitlerin hematolojik parametreler üzerine etkisini inceleyen ça-lışmaların çok az ve yetersiz olduğu dikkat çekmektedir. Bu çalışma ile yumurta tavuğu rasyonlarına katılan humat ile organik asitlerin bazı hematolojik parametreler üzerine etkisinin incelenmesi amaçlanmıştır.
Materyal ve Metot
Araştırmada 40 haftalık Bovans ırkı, 30 beyaz yu-murta tavuğu kullanıldı. Tavuklar tartılarak canlı ağırlık-ları benzer olacak şekilde eşit 3 gruba ayrıldı. Kontrol grubuna bazal (kontrol) rasyon verilirken, deney grupla-rından birine % 0.20 oranında organik asit (Sal-Tech) katılan rasyon, diğerine % 0.15 oranında humat (Farmagulatör Dry) ilave edilen rasyon 60 gün süreyle yedirildi. Sal-Tech (% 15 propiyonik asit, %24 formik asit, % 3 Amonyum hidroksit) Alltech firmasından, Farmagülator Dry (160 mg polimerik polihidroksi asit (humik, fulvik, ulmik ve humatomelanik asit), mineral-ler; Mn, 50 mg; Zn, 60 mg; Fe, 60 mg; Cu, 5 mg; Co, 0.2 mg; I, 1 mg; Se, 0.5 mg ve az miktarlarda Al, Na, K, Mg ve P) ise Farmavet A.Ş#8217;den temin edilerek önerilen doz-larda yeme katılmıştır. Grupların her biri ısı, ışık gibi çevresel faktörlerin etkisini azaltmak amacıyla 4#8217;erli gruplar halinde 55 x 44 cm ebatlarındaki bölmelerde barındırıldı. Hayvanlara yem ve su ad libitum verildi. Gün ışığı ile beraber günde 17 saat aydınlatma uygulan-mıştır. Araştırmada kullanılan karma yemlerin besin maddesi miktarları Amerikan Resmi Analitik Kimyacılar Birliğinin (AOAC) bildirdiği metotlara (1) göre belirle-nerek Tablo 1#8217;de verildi.
Tablo 1. Kontrol grubuna verilen bazal rasyon bileşimi.
Table 1. The composition of basal (control) diet.
Yem Maddesi, %
Mısır 34.136
Buğday 30.000
Soya küspesi 6.034
Ayçiçeği küspesi 7.042
Tam yağlı soya 10.000
Et kemik unu 3.727
Mermer tozu 8.309
Tuz 0.273
Metiyonin 0.125
Lizin 0.027
Fitaz 0.070
Vit-Min. Premix* 0.257
Kimyasal analiz
ME, kcal/kg** 2750
Ham protein 16,50
Ham selüloz 3.81
Ham kül 12.68
Ham yağ 4.44
Kuru madde 88.85
Ca** 3.75
Değerlendirilebilir P** 0.44
* : Her 2.5 kg#8217;lık karışımda 12.000.000 IU A vitamini, 2.000.000 IU D3 vitamini, 20 g E vitamini, 3 g K3 vitamini, 3 g B1 vitamini, 5 g B2 vitamini, 20 g Niasin, 20 g Ca.D.pantotenat, 5 g B6 vitamini, 0.015 g B12 vitamini, 0.76 g Folik asit, 0.05 g D-Biotin, 50 g C vitamini, 150 g Kolin klorit, 1.5 g Kantaksantin, 80 g Mangan, 60 g Demir, 60 g Çinko, 5 g Bakır, 0.2 g Kobalt, 1 g iyot, 0.15 g Selen-yum bulunmaktadır.
**: Hesapla bulunmuştur.
Deneme sonunda tavukların kanat altı venasından kan alınarak eritrosit ve lökosit sayıları ile hematokrit değer, hemoglobin miktarı ve lökosit alt tipleri klas** metotlara göre (15) değerlendirildi. Ayrıca, % T lenfosit oranlarını belirlemek amacıyla hazırlanan frotiler Muller ve ark. (17) belirttiği şekilde, T lenfositlere özgü alfa naftil asetat esteraz (ANAE) enziminin gösterilmesi esasına dayanarak boyandı ve mikroskopta kahverengim-si granülleri bulunan lenfositler ANAE-pozitif kabul edilerek %T lenfosit oranları belirlendi.
Her parametre için gruplar arasında önemli bir fark olup olmadığını belirlemek için tek yönlü varyans analizi (One-way ANOVA) ve farkın anlamlı olduğu durumlar-da çoklu karşılaştırma testlerinden Scheffe testi uygulan-dı. Önemlilik düzeyi p<0.05 olarak kabul edildi.
Bulgular
Kontrol ve deney gruplarından elde edilen bulgular Tablo II#8217; de verilmiştir. ANAE-pozitif lenfosit örneği Şekil 1#8217;de gösterildi. Kontrol grubuna göre organik asit ve humat verilen grupların heterofil oranında istatistiksel olarak önemli bir artma (p<0.05) tespit edildi. Ayrıca, humat verilen grupta eritrosit sayısı ile hemoglobin mik-tarlarında önemli bir artma (p<0.05) kaydedildi. Humat ilave edilen grubun hematokrit düzeyinde bir artma göz-lenmesine rağmen bu artış istatistiksel olarak anlamlı bulunmadı. Diğer parametrelerde ise herhangi bir deği-şiklik tespit edilmedi.
Şekil 1. Tavuk kanında ANAE boyaması. Ok: T lenfositte ANAE pozitif granüller, x 400.
Figure 1. ANAE staining in peripheral blood of hen. Arrow: ANAE positive granules in T lymphocyte, x 400.
Tartışma ve Sonuç
Humat ve organik asitlerin bazı hematolojik para-metreler üzerine etkilerinin incelendiği araştırmada, kontrol grubuna ait hematolojik parametre değerleri literatür verilerine uygun bulunmuştur (15, 32).
Çalışmada, humat verilen grupta eritrosit sayısı ve hemoglobin miktarında artma gözlenmesi, Banaszkiewick ve Drobnik (3)#8217;in deney hayvanlarında verilen humik asidin globulin, hemoglobin ve hematokrit düzeyleri ile alyuvar sayısını artırdığı yönündeki bulguları ile benzer-lik göstermekle birlikte, çalışmada hematokrit değer gözlemlenen artış istatistiksel olarak anlamlı bulunmadı. Humatın bu etkisi, demir veya globulin miktarını artır-masına bağlanabilir. Ayrıca, humat ilave edilen yemle beslenen sığırların hemoglobin düzeyinin arttığı yönün-deki bildirimler (26) ile humik asidin demir ve çinko gibi metallerin hücre membranından geçişlerini kolaylaştırdı-ğı (30) ve humatların demir emilimini artırdığı (8, 28) yönündeki bildirimler de bulgularımızı destekler nitelik-tedir. Fuchs ve ark. (8), humik asidin demir tutulumunu artırıcı etkisinden dolayı demir eks**liğine bağlı anemi-lerde tedavi amacıyla kullanılabileceğini bildirmiştir. Araştırmadaki bulgulardan farklı olarak, humik ve fulvik asit içeren humifulvat konsantresinin hemoglobin ve hematokrit değerleri üzerine önemli bir etkisinin olmadı-ğı bildirilmiştir (11). Bu farklılık humifulvat içeriğinin humat içeriğinden farklı olmasından kaynaklanabilir. Bulgularımıza paralel olarak, humik asidin irradiye edil-miş ratlarda azalan eritrosit sayısı ile hemoglobin ve hematokrit değerlerini artırdığı ileri sürülmüştür (11). Literatürde organik asitlerin eritrosit sayısı ile hemoglo-bin ve hematokrit değerler üzerine doğrudan etkisi ile ilgili herhangi bir veriye rastlanmadı. Organik asitlerden sitrik, malik ve tartarik asitin demir emilimini artırdığı bildirilmekle (10) birlikte çalışmada kullanılan propiyonik ve formik asitin hemoglobin miktarı üzerine etkisinin bulunmadığı saptanmıştır.
Çalışmada, yeme ilave edilen humat ve organik asitler, total lökosit sayısı ile lenfosit, eozinofil, monosit, bazofil ve T lenfosit oranlarında herhangi bir değişiklik oluşturmadı. Benzer şekilde, humifulvat konsantresinin de lökosit sayısını etkilemediği kaydedilmiştir (11). Öte yandan, in vitro ortamda, lenfosit hücre kültürlerine ilave edilen propiyonik asitin lenfositlerde DNA sentezini baskıladığı gözlenmiştir (21). Başka bir çalışmada (22) ise propiyonik asidin insan lenfositlerinin çoğalmasını hafif düzeyde baskıladığı tespit edilmiştir. Benzer bulgu Wajner ve ark. (31) tarafından da bildirilmiştir. Elde edilen farklı sonuçlar, deney ortamından (in vitro veya in vivo) veya kullanılan metottan kaynaklanabilir. Öte yan-dan, yüksek dozda (250 ve 500 µg/ml) verilen humik asidin in vitro koşullarda, insanların periferik lenfositle-rinde zayıf bir toksik etki oluşturduğu ve bu etkinin humatların heterojenik yapısından kaynaklanabileceği ileri sürülmüştür (11). Joone ve ark. (13), oksihumatın insanlarda lenfositleri uyardığını saptamışlardır.
Çalışmada, humat ve organik asit ilavesinin heterofil oranını artırdığı tespit edildi. İnsanlarda humatın granülositlerin işlevlerini (20) ve adhezyonunu artırdığı (7) yönündeki bildirimler bulgularımızı destekler nitelik-tedir. Araştırmacılardan Sumi ve ark. (25), propiyonik asidin insan nötrofillerinde süperoksit oluşumunu artırdı-ğını belirlemişlerdir. Benzer bulgu Campo ve Davila (5) tarafından da bildirilmiştir. Anılan araştırıcılar, sıcaklık stresine maruz bırakılan piliçlerde, organik asitlerden laktik asitin heterofil oranını artırdığını saptamışlardır.
Araştırmada, humat ve organik asit ilave edilen grupların trombosit sayısında herhangi bir değişiklik gözlenmemesi, humik asidin ratlarda platelet sayısını etkilemediği yönündeki bulgular (4) ile örtüşürken, irradiye edilen ratlarda humifulvat konsantresinin trombosit sayısını artırdığı bildirimi (11) ile uyuşmamak-tadır. Bu farklılık humat içeriğinin ya da humifulvat konsantresinin dozundan kaynaklanabilir.
